Comment déterminer la concentration de paracétamol dans un échantillon

paracétamol , ou acétaminophène , est un analgésique over-the -counter commun dans les médicaments comme le Tylenol . Il est possible de déterminer la concentration d'acétaminophène dans un échantillon avec une variété de méthodes . Le plus pratique pour vous dépendra de la nature de l'échantillon et le niveau de sensibilité et de précision dont vous avez besoin . Une des nombreuses approches possibles consiste spectrophotométrie - brille la lumière d'une longueur d'onde particulière par votre échantillon et en utilisant l'absorbance de comprendre comment la quantité d'acétaminophène était présent . La méthode décrite ici a été rapporté dans le « Journal of Food and Drug Analysis" dans 2008.Things Vous aurez besoin
gants, des lunettes et une blouse de laboratoire ( les mettre sur avant de commencer )
micropipette calibrée avec embouts de plastique jetables Photos 4 pour cent de cuivre ( II ) sulfate dans l'eau ( réactif C )
tubes à essai et support de tube à essai
acide bicinchoninique de 4 pour cent ( BCA ) dans l'eau ( réactif B )
Parafilm
acétate d'éthyle le chlorure de sodium
hotte
Spatule
pipettes Pasteur avec ampoule
solution standard de l'acétaminophène avec de la Cuvette de concentration connue
spectrophotomètre
de caoutchouc Voir Plus Instructions
Photos 1

Mesurer 200 microlitres de réactif C avec votre micropipette et l'ajouter à un tube à essai propre . Mesurer 5 millilitres de réactif B , ajoutez-les à l'éprouvette et agiter doucement pour mélanger .
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Couvrir le tube à essai avec du parafilm et le conserver pour un usage ultérieur .

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pipette 0,5 ml de votre inconnu dans un autre tube à essai .
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Transférez vos tubes à essai à la hotte .
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Ajouter un millilitre de acétate d' éthyle à l'inconnu , suivie de quelques cristaux de chlorure de sodium . Boucher le tube à essai et agiter vigoureusement pendant 30 secondes pour mélanger le contenu , en étant sûr de tenir votre pouce sur le bouchon en tout temps comme vous le faites . Immédiatement après, enlever le bouchon pour relâcher la pression , puis reboucher le tube .
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Laisser le contenu du tube pour séparer en deux couches . L'acétate d' éthyle est moins dense et donc formera la couche supérieure ou " phase organique ". Ajouter 2 mL de la solution que vous avez préparé à l'étape 1 dans un autre tube à essai propre .
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En utilisant un de vos pipettes Pasteur , transvaser soigneusement la couche inférieure pour un tube à essai propre, puis transférer la couche organique dans le tube contenant les 2 ml de réactif mixte . Prenez ce tube et agiter doucement ou couronner le vortex et se mélanger . Laisser reposer à la température ambiante pendant cinq minutes .
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Prenez une cuvette propre et ajouter 1 ml d'eau déminéralisée . Placez-le dans le spectrophotomètre et l'utiliser comme un blanc pour corriger la lecture du spectrophotomètre . Les instructions précises à suivre pour l'utilisation de votre spectrophotomètre dépendra du fabricant . Voir les lignes directrices pour plus de détails .
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Nettoyer la cuve et le sécher ( ou utiliser un autre cuve propre ) et ajouter un peu de votre réactif mixte dans une cuvette propre jusqu'au 1 ml marque complète . Placez la cuve dans le spectrophotomètre et mesurer son absorbance .
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Ajouter 1 ml de la solution standard dans une cuvette propre ( soit propre et sécher l'ancien ou utiliser un nouveau) , puis le tester dans la cuvette et enregistrer son absorbance .
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Ajouter 1 ml de votre inconnu dans une cuvette propre, le placer dans le spectrophotomètre et mesurer son absorbance .
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Soustraire l'absorbance du mélange réactif à blanc à partir de l'absorbance de l'inconnu. Faites de même pour la norme .
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Diviser le résultat de l'inconnu par le résultat de la norme , puis multiplier par la concentration d'acétaminophène dans la norme . Cela vous donnera votre taux d' paracétamol .