Comment faire un tampon de transfert de Bis-Tris

Le couplage du bis -tris est important en biochimie raison de sa capacité à agir comme un zwitterion , possédant un ion positif et négatif sur la molécule. Il peut servir de tampon dans la région de pH de 7,6 . Il est ajouté aux gels utilisés en électrophorèse pour aider à maintenir les molécules en solution et aide à la séparation des molécules . Tampons de transfert supprimer molécules de plaques de gel de l'analyse d'électrophorèse et les transfèrent à membranes pour western blot . Chaque fabricant de rapports sur l'équipement d'électrophorèse légèrement différentes de recettes pour faire un tampon de transfert , mais ce qui suit est pour le tampon de transfert utilisé avec les systèmes NuPAGE sur samples.Things non réduits Vous devez
Bis -tris
EDTA
bécher de 250 ml de méthanol

1000 ml bouteille
eau ultra-pure
Voir Instructions
1

Préparer les ingrédients de la mémoire tampon en pesant les quantités de chaque composant sur ​​une balance analytique. Les trois composants secs pour un tampon de transfert est bicine , bis -tris et de l'EDTA . Poids à 4,08 bicine g , 5,23 g de bis -tris et 0,29 g d'EDTA sur un papier pesant individuels .
2

Ajouter ces composants à un bécher de 250 ml . Dissoudre ces composants avec 100 ml de methanol. Remuer jusqu'à ce que les solides se dissolvent .
3

Transférez les composants dissous à un flacon de 100 ml et laver bécher avec de l'eau ultra pure pour assurer le transfert de tous les composants .
4

Remplissez le reste du volume de 1 litre avec de l'eau ultra-pure . Ajouter l'eau dans les parties qui permettent un mélange suffisant entre chaque addition . Bien mélanger le contenu pour atteindre une concentration uniforme .