Comment savoir si un aptamère a trouvé sa cible

Les aptamères sont des chaînes relativement courtes de nucléotides créés pour se lier à une cible spécifique. Les nucléotides sont les mêmes composants qui forment des molécules d'ADN ou d'ARN , et quand ils sont mis dans la bonne configuration , ils sont hautement spécifiques et ont une haute affinité pour leurs cibles. Les moyens de haute spécificité l'aptamère se lie uniquement à la cible, il est conçu pour , et des moyens de haute affinité l'aptamère se lie très facilement à sa cible .
Mais ce ne sont que de petites molécules , et vous ne pouvez pas juste prendre un coup d'oeil et voir que leur correspondance avec leurs objectifs . Heureusement , il existe des moyens pour obtenir que aptamère faire rapport. Il existe deux configurations générales différentes, l'une dans laquelle l'aptamère se lie son objectif interne ou à un seul site de liaison externe , et l'autre dans laquelle la cible se lie à deux sites.Things Vous devez
équipements de synthèse aptamères Photos électrodes d'or et les molécules cibles de nanoparticules dans des solutions tampons appropriées
ampèremètre de
Montrer Instructions
simple Binding Site
1

Attacher un complexe de ferrocène à une extrémité de l'aptamère . Ferrocène est un composé organométallique qui a de bonnes propriétés de transfert d'électrons .
2

Construire l'aptamère avec un groupe thiol de mettre fin à l'autre extrémité . Le groupe thiol est un arrangement soufre hydrogène qui a une forte affinité pour l'or .
3

Construire une électrode en or , et permettent aux aptamères pour fixer à la surface .

4

Plongez l'électrode dans la solution d'intérêt , et suivre le courant . Lorsque l'aptamère se lie à sa cible, il va changer sa configuration et mettre à ses deux extrémités proches les uns des autres . Cela porte le ferrocène proche de l'électrode d'or , ce qui augmente le courant , si le contrôle du courant peut vous dire combien de aptamères ont trouvé leurs cibles .
Double Binding Site
5 le changement de couleur est une méthode de vérification de la liaison aptamère .

Immobiliser une extrémité d'un aptamère à une surface fixe .
6

Présentez la molécule cible dans la solution environnante aptamères sur la surface fixe .
7

construire un aptamère spécifique à la même molécule cible , et joindre une nanoparticule d'or à l'autre extrémité .
8

Laver la solution , puis d'introduire une solution de croissance de nanoparticules . La solution de croissance va déposer l'or supplémentaire sur les graines de nanoparticules et de créer un changement de couleur visible lorsque la molécule cible est présente. Vous pouvez juste regarder à la surface et voir la différence de couleur où l'aptamère a trouvé sa cible .